Chimie

Outils de génie génétique


Effet du traitement à la phosphatase

Si une seule enzyme de restriction est utilisée dans un clonage, un traitement à la phosphatase doit être effectué pour empêcher la monoligation du vecteur.

Le tableau suivant donne un aperçu de l'influence du traitement à la phosphatase sur le résultat de clonage attendu.

Tab.1
Aperçu de l'influence du traitement à la phosphatase sur le résultat de clonage attendu
phosphoryléDéphosphoryléphosphoryléDéphosphorylérelation amoureuseRésultat
vecteurOligonucléotide1:1vecteur vierge
vecteurOligonucléotide1:10principalement vecteur
vecteurOligonucléotide1:100petit produit
vecteurOligonucléotide1:1000la même quantité de produit et de vecteur
vecteurOligonucléotide1:1Produit avec très peu de vecteur
vecteurOligonucléotide1:10seul produit
vecteurOligonucléotide1:100Produit également avec insert multiple
vecteurOligonucléotide1:1.000beaucoup de produit avec plusieurs inserts
vecteurOligonucléotideOligonucléotide1:1vecteur vierge
vecteurOligonucléotide1:10vecteur vierge
vecteurOligonucléotide1:100vecteur vierge
vecteurOligonucléotide1:1.000vecteur vierge
vecteurOligonucléotide1:1rien, assiettes vides
vecteurOligonucléotide1:10rien, assiettes vides
vecteurOligonucléotide1:100rien, assiettes vides
vecteurOligonucléotide1:1.000rien, assiettes vides
vecteurOligonucléotide1:1vecteur vierge
vecteurFragment de restriction1:10principalement vecteur
vecteurFragment de restriction1:100petit produit
vecteurFragment de restriction1:1.000la même quantité de produit et de vecteur
vecteurFragment de restriction1:1Produit avec très peu de vecteur
vecteurFragment de restriction1:10seul produit
vecteurFragment de restriction1:100Produit également avec insert multiple
vecteurFragment de restriction1:1.000beaucoup de produit avec plusieurs inserts
Noter
Le terme oligonucléotide est utilisé pour des séquences linéaires allant jusqu'à environ 20 mononucléotides qui sont liés par des ponts diester d'acide phosphorique de l'atome 3'-0 d'un nucléoside à l'atome 5'-0 du suivant.
Le terme fragment de restriction désigne les produits d'une digestion de restriction. La longueur n'est pas limitée par définition.


Vidéo: Outils de génie génétique (Janvier 2022).